Весь спектр оборудования
для вашей лаборатории
г. Новосибирск,
ул. Часовая, 6, к. 1
sales@promix.ru
пн-чт с 9:00 до 18:00
пт с 9:00 до 17:00
8 (383) 336-01-66
Оставить заявку

Мир Микроскопии : Вопросы и ответы

Егорова Ольга Владимировна : Вопросы по микроскопии
На все вопросы по микроскопии, методам контрастирования и настройке микроскопов всех типов ответит, а также даст рекомендации по переоснащению и разовым закупкам оптического оборудования кандидат технических наук, эксперт Госстандарта РФ по оптическому приборостроению, член Нью-Йоркской Академии наук, автор серии книг "С микроскопом на "ты" , "Шаг в ХХI век " и "Техническая микроскопия", а также соавтор книг "Компьютерная микроскопия" (Пантелеев В.Г и др.), "Основы цитологической диагностики и микроскопическая техника" (Полонская Н.Ю.), "Световой микроскоп как инструмент в биотехнологии растений" (Круглова Н.Н. и др.), автор более 200 статей по микроскопии и более 10 авторских свидетельств по объективам микроскопа (в соавторстве) ЕГОРОВА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА, (Санкт-Петербург).
15.01.2012 22:56, Елена, г. Харьков
Подскажите пожалуйста характеристики микроскопа МБИ 15У4.2. Заранее спасибо!!!

Ответ
В свое время я уже писала об этом микроскопе, поэтому повторюсь кратко. Первая отечественная разработка, в которой оптическая схема была полностью аберрационно рассчитана (д.т.н.Грамматин Александр Пантелеймонович, ВНЦ ГОИ им. Вавилова, выпускаемые ОАО ЛОМО). МБИ - микроскоп биологический исследовательский: проходящий и отраженный свет; светлое поле, темное поле, фазовый контраст, поляризация, люминесценция, встроенная фотосистема; в бинокулярной насадке наличие дополнительной системы увеличения оптовар 1,1х; 1,6х, 2,5х; оптика рассчитана на конечную длину тубуса - 160 мм; большой смешанный комплект объективов с высотой 33 мм и 45 мм. При этом объективы с высотой 45 мм планапохроматической коррекции серии ОПА, выравненный хроматизм увеличения - 2% (д.т.н. Андреев Лев Николаевич). Большой комплект окуляров.Более подробную информацию можно найти в книге Скварцов Г.Е. и др. "Микроскопы", 1969 г.
14.01.2012 14:25, Евгения, молдова
Здравствуйте, Ольга Владимировна! Пожалуйста, посоветуйте вариант комплектации люминесцентного микроскопа Axio Scope A1 (Carl Zeiss) со светодиодным освещением для иммунофенотипирования клеток крови. Заранее благодарю.

Ответ
Слишком много разных мнений по поводу диодного освещения в люминесценции. В процессе апробации видела как положительные эффекты люминесценции (свечения) , так и отрицательные, связанные с применением стандартных красителей. Однако есть чисто технологические преимущества и недостатки. Явно положительными являются "чистота" при наблюдении (редок фон засветки); отсутствие обжигающего тепла; возможность регулировки мощности свечения. Но самое неприятное - подбор самого светодиода, т.е. длины волны возбуждения. Давайте подбирать: для этого мне необходимо знать длину волны возбуждения и эмиссии ваших красителей. Цейсс , например, в последнее время рекомендует применение Colibri 2, но больше, конечно, для исследовательской работы. Ртутная лампа хороша тем, что она, имея линейчатый спектр в широком спектральном диапазоне, дает возможность выделять ту или иную длину волны (с большей или меньшей интенсивностью). Диодный источник, имея определенную длину волны имеет небольшую ширину полосы , что не гарантирует достаточной мощности возбуждения. Количество диодов в настоящий момент недостаточно для свободного выбора. Давайте попробуем. Жду от вас информации.
13.01.2012 13:06, Орлова Татьяна, г.Москва
Мы хотели приобрести микроскоп Цейсс Праймостар,но Ваша поклонница к.м.н.Шаталова Марина Сергеевна сказала,что Вы негативно относитесь к этому микроскопу.Скажите,пожалуйста,почему? Заранее благодарим и наслаждаемся Вашей книгой

Ответ
Primostar - микроскоп эконом класса, был разработан лет 7 тому назад. Первые варианты не выдерживали требований по цветопередаче, по контрасту, по надежности, особенно блок питания и предметный стол. За это время произошла модернизация микроскопа и не одна. В течение прошлого года мы следили за мнениями специалистов, купивших микроскопы в последние 2 года. Сами проанализировали последние экземпляры новых микроскопов. И вы знаете пришли к положительному выводу. Primostar последнего года выпуска вполне соответствует своему классу. Главное, что блок питания стал более надежным. Объектив 100х стал лучше (судя по всему, появился опыт в сборке). Вы, правда, не написали что вы смотрите. Это очень важно. Для гистологии - микроскоп очень даже приемлем. Для просмотра крови или рутинных работ клинических исследований - сейчас стал лучше, а вот все-таки для цитологии - я бы все-таки взяла микроскоп получше. Кстати, т.к. адрес вашей электронной почты не существует я могла бы вам и не отвечать, однако мне бы хотелось, чтобы информация о самом микроскопе дошла до пользователей. Впредь прошу наших респондентов быть более честными по отношению ко мне. С уважением, ОВЕ
11.01.2012 10:58, Дмитрий, Москва
Уважаемая Ольга Владимировна, здравствуйте! Позвольте поблагодарить Вас за ведение такой странички с вопросами и ответами, которая для многих - кладезь пользительнейшей информации. Спасибо! Приобрел для домашнего пользования Микромед 3(3-20) и решил дооснастить его ФК. В связи с этим вопросы: 1) возможно ли будет использовать конденсор ФК для получения темного поля с "родными" светопольными объективами, или ТП при ФК и обычное ТП это разные понятия и для получения ТП со светлопольными объективами потребуется, все-таки, отдельный специализированный конденсор ТП; 2)возможна ли будет в дальнейшем доукомплектация подходящими ФК-объективами от других производителей или только "родные" ФК-объективы можно использовать с конкретной моделью ФК-конденсора; 3) в случае будущей замены светлопольных объективов на лучшие, подойдут ли по резьбе соответствующие "бесконечные" DIN объективы Цейса, Олимпуса или Лейки? Спасибо. С уважением.

Ответ
Во-первых, отмечаем, что микроскоп рассчитан на длину тубуса "бесконечность", т.е. взаимная оптическая коррекция системы "объектив+тубусная линза". Теперь ответы на воспросы. 1) возможно ли будет использовать конденсор ФК для получения темного поля с "родными" светопольными объективами? Ответ: да, применение универсального конденсора гарантировано с объективами числовой апертурой до А=0,6 (0,65 - с небольшой корректировкой положения конденсора и без гарантии хорошего качества) . Специальные темнопольные конденсоры нужны в том случае, если вы все-таки хотите иметь хорошее темное поле с объективами 40х0,65 и 100х1,25МИ; 2)возможна ли будет в дальнейшем доукомплектация подходящими ФК-объективами от других производителей или только "родные" ФК-объективы можно использовать с конкретной моделью ФК-конденсора? Ответ: лучше пользоваться "родными", т.к. и конструктивно и расчетно все лучшим образом подогнано - важно, чтобы световое кольцо конденсора проектировалось и вписывалось в фазовое кольцо объектива - лучше расчетчика этих систем об этом никто не знает. Для использования всего "неродного" требуется уточнять посадочные места конденсора, соответствие оптической коррекции тубусной линзы самого микроскопа и неродных объективов... ; 3) в случае будущей замены светлопольных объективов на лучшие, подойдут ли по резьбе соответствующие "бесконечные" DIN объективы Цейса, Олимпуса или Лейки? Ответ: по идеи должны.
06.01.2012 00:19, Сергей, Днепропетровск, Украина
Вдогонку к своему вопросу о микроскопе Micromed XS-5510 - что, по-вашему, лучше - этот микроскоп или Konus Academy? Спасибо!

Ответ
Второй указанный вами микроскоп - учебный для школ. Слишком прост. Значит и качество изображения соответствующее.
05.01.2012 19:11, Евгений , Москва
Добрый день, уважаемая Ольга Владимировна. Приобрел б/у микроскоп Olympus CH 30. Судя по отсутствию маркировок на объективах и тубусе, возможно переукомплектованный. Микроскоп тринокулярный, объективы на 160 мм. Картинка жуткая, хроматические аберрации по всему полю, по краям изображение размытое. Хотелось бы улучшить картинку. Вижу два варианта. Первый - простой, поменять объектив на более современный, но не знаю где купить и насколько он будет согласован с тубусом (окуляры WF 10/18 без дополнительных маркировок). Второй вариант - глобальный: модернизировать микроскоп под объективы на бесконечность. Но не знаю насколько это возможно и насколько бесконечные объективы лучше 160-ых. Микроскоп используется для гемосканирования в светлом поле. Используется только один объектив 100. Пытался поставить бесконечный объектив от современного Олимпуса исследовательского класса, стало хуже по резкости. Пожалуйста, подскажите, что можно сделать. Может быть еще сможете порекомендовать бюджетную камеру или видеоокуляр.

Ответ
Вы знаете, я бы не пыталась что-то с этим микроскопом страшное делать. Попробуйте купить объектив 100хМИ (ОХ-100) ОАО ЛОМО от МИКМЕД 2 (только именно от этой модели) или планапохромат ОПА 5 (от МБИ 15, ОАО ЛОМО) - правда, в последнем случае есть возможность получить ухудшение качества за счет наличия в объективе 2% хроматической разности увеличения. Нельзя комплектовать микроскоп с длиной тубуса 160 мм объективами, рассчитанными на "бесконечность" , т.к. дополнительно требуется установить тубусную линзу в бинокулярную насадку. Хотя подобные прецеденты существуют, особенно на малых увеличениях - чем меньше увеличение, тем качество может быть лучше, но все-таки целесообразно пользоваться тем комплектом оптики, на который разработаны оптическая и механическая конструкция собственно микроскопа.
05.01.2012 19:03, Иван, Новосибирск
Здравствуйте, Подскажите пожалуйста где можно приобрести ваши книги. На Озоне их нет в наличии. В других интернет-магазинах найти не удалось.

Ответ
Напишите, какая именно книга вас интересует - попробую помочь.
05.01.2012 02:44, Артур, Украина
Здравствуйте, Ольга Владимировна! Есть микроскоп МБР-1. Очень охота сделать к нему внешний осветитель. Есть галогенная лампочка 12 В 50 Вт и "прямые руки". Направьте на правильный путь, хотя бы в общих чертах. Или посоветуйте литературу, или источник в Интернете. Большое спасибо.

Ответ
Вы знаете, я бы приспособила диодный фонарь китайский (светящий поярче)- продаются такие кубиком (может даже типа налобного). Настроить просто - выньте окуляр и заполните при с фокусированном объективе выходной зрачок объектива светом. Если видите тени от пакета диодов - положите матовое стекло. Сам фонарик придвиньте как можно ближе к апертурной диафрагме конденсора (но ни в коем случае не вставляйте в апертурную диафрагму - она должна оставаться регулируемой в зависимости от числовой апертуры объектива). Касаемо галогенного источника - суть та же. Можете закрепить в патрон и установить в откидное кольцо в конденсоре, предназначенное для светофильтра. Боюсь только, что зрачок можете светом не заполнить - нужна коллекторная линза. Суть в том, что мало иметь яркий источник света, он должен быть растянут на столько , чтобы закрывать выходной зрачок объектива и освещать равномерно поле, которое реализуется окуляром. Вот два основных условия. А разве в магазине нет сейчас штатных осветителей типа ОИ 32-35 (ОАО ЛОМО )? Или это очень дорого?
02.01.2012 02:23, Светлана, мнс, Киров
Здравствуйте, Ольга Владимировна! Расскажите пожалуйста технику безопасности при работе на люминесцентном микроскопе. У нас марки ZEISS, исследования генетических нарушений, метод FISH. Буду очень признательна, если продублируете ответ на мой электронный адрес. Спасибо заранее.

Ответ
Прежде всего, при работе с люминесцентными микроскопами необходимо соблюдать следующие правила: 1. Микроскоп должен иметь защитный экран, предотвращающий попадание прямых и отраженных от препарата лучей; 2. Сам микроскоп должен быть установлен на столе таким образом, чтобы вокруг него было достаточно воздушного пространства для обеспечения хорошего теплообмена (от стены до узла крепления лампы как минимум 250 мм , до верхнего предмета - полки, например,- 500 мм), речь идет о ртутном источнике света. Если это диодное освещение или металлголоидная лампа - это не столь актуально, в этом случае металлические детали конструкции не сильно нагреваются. 3. Нельзя непосредственно смотреть на световой поток - можно получить ожег глаз. 4. Нельзя трогать узел крепления лампы, если лампа работает или только что была выключена (необходимо дать остыть минут 15) - можно обжечь пальцы. 5. Осторожно пользоваться иммерсионным маслом : нельзя тереть глаза, испачканными руками.
28.12.2011 15:44, Сергей, Днепропетровск, Украина
Уважаемая Ольга Владимировна! Хочу приобрести микроскоп для продвинутого домашнего использования (наблюдение живых и окрашенных биологических объектов, включая бактерий). Думаю о приобретении микроскопа Micromed XS-5510 (Китай, продаются многими фирмами на Украине). Информацию можно посмотреть, например, здесь: http://reagent-alfa.dp.ua/index/mikroskopy_xs_5510_micromed/0-352 Вы не сталкивались с этими микроскопами на практике (качество исполнения, оптики, изображения и т. д.)? Можно ли в них, судя по характеристикам, настраивать освещение по Келлеру? Спасибо!

Ответ
Я поняла, что это микроскоп монокулярный с преднастроенным Келером, т.е. не надо настраивать самим. Обычный БИОЛАМ Р11 (ОАО ЛОМО). Думаю, что для домашнего пользования он всяк будет лучше микроскопов серии Левенгук.
26.12.2011 22:45, Валентин, Киев
Несколько раз сталкивался с FISH, теперь стоит задача подобрать микроскоп для этих исследований. Вопрос вот в чём, какие фильтры используются при FISH, длина и т.д. Связывался с несколькими поставщиками, но чёткого ответа так и не услышал. Какие фильтры наиболее часто используются при FISH? Благодарю за ответ.

Ответ
Метод флуоресцентной гибридизации in-situ предполагает непосредственную гибридизацию маркированных флуоресцентными красителями ДНК-зондов с препаратом хромосом. Для этого чаще всего используют красители; 1-ый: DAPI (возб. - 358 нм, эмис. -463 нм); 2-ой: FITC (возб. - 495 нм, эмис. - 517 нм); 3-ий: Rhodamin (возб. - 551 нм, эмис. - 573 нм) или TRITC (возб. - 550 нм, эмис. - 573 нм. Rhodamin имеет порядка 9 модификаций с разными спектрами возбуждения и эмиссии; DAPI и FITC - по две. Исходя из этого и следует выбирать блоки люминесцентных светофильтров. У Zeiss это могут быть 02 (49); 09 (10); 43 (20). Могу сказать, что я специально посмотрела, какой набор блоков сейчас предлагает Цейсс - это от 9 до 20 блоков для указанных красителей - очень широкий диапазон. На самом деле, главное - это владение самой методикой и выполнение правильной пробоподготовки. Касаемо микроскопа. Здесь могу сказать следующее: микроскоп по классу сложности должен быть не ниже лабораторного (мощность ртутного источника не ниже 100Вт), револьверное устройство должно обеспечивать крепление не менее 3люминесцентных блоков + гнездо свободное для проходящего света; объективы 100х хорошо бы флюоритовые, т.е. объективы с повышенной числовой апертурой (Plan-Neofluar, например, как у Цейсс). И фазовый контраст для поискового объектива (10х-20х). Лучше бы револьверное устройство крепления блоков иметь моторизованным.
22.12.2011 11:15, Павел, Алмата
Здравствуйте Ольга Владимировна. Подскажите пожалуйста какой микроскоп подойдёт для лаборатории спиртового завода. Назначение его контролировать процесс выращивания дрожжей. Заранее признателен.

Ответ
Вы знаете, сколько я не посещала предприятий пищевой промышленности (пивзаводы, молокозаводы, винные заводы) в зависимости от квалификации специалистов и размаха производства я видела в лабораториях простые биологические микроскопы , а также стереоскопические проходящего св (для чашек Петри), в некоторых производствах использовались инвертированные микроскопы проходящего света. Для того, чтобы рекомендовать вам тот или иной микроскоп необходимо знать предполагаемую методику исследования, рекомендованную в вашем производстве.
21.12.2011 14:04, Марина, Новосибирск
Ольга Владимировна, скажите пожалуйста, модуль дополнительного увеличения для стандартной цитогенетики лучше приобрести на 1.2х , 1.6х , или 2,5. Микроскоп Карл Цейс, АксиоСкоп .А1. Слышала, что 2,5 необходим для анализа ФИШ по флюоресцентным меткам. Какой объектив (20х или 40х)лучше брать на тот же микроскоп по цитогенетике для фазово-контрастного исследования.

Ответ
При цитогенетических исследованиях фазовый контраст обычно необходим для обнаружения неокрашенного объекта. Поэтому увеличение зависит от вашего удобства - чем больше увеличение, тем меньше поле, поэтому для поиска метофазы по предметному стеклу лучше пользоваться объективом меньшего увеличения. Я видела, например, в лабораториях, как объектив 10х (чаще), так и 20х в фазовом контрасте. Касаемо модуля дополнительного увеличения.Т.к. в стандартную комплектацию микроскопов входит окуляры только одного увеличения 10х, то для реализации, по крайней мере, пределов полезного увеличения (500-1000 апертур объектива) целесообразно использовать Оптовар.Например, для объектива 40х0,65 без потери качества можно использовать окуляр 10х и систему 1,6х, для 50х1,0 - опять же подходит 1,6; для 20х0,40 - 1,6х и 2,5х; для 100х1,25 - 1,25х. Это для визуального наблюдения. Для люминесценции важно то, количество световых фотонов , которые объектив может "собрать". И это связано с выходной числовой апертурой объектива. Например, для объектива 40х0,65 эта величина составляет 0,016. Т.к. собственно изображение формируется в плоскости изображения с помощью объектива и дополнительных систем увеличения, то эта система влияет на все выходные параметры объектива в следующем порядке : увеличение становится больше, линейное поле - меньше, выходная числовая апертура - меньше , а раз выходная апертура меньше, значит и регистрируемый сигнал будет слабее. Короче, я бы не выходила за рамки полезного увеличения. Взяла бы систему 1,6х - она подойдет для всех объективов. А у тех, кто рекомендует 2,5х уточнила бы - что она дает, кроме увеличения (поле меньше, регистрируемый сигнал меньше...) ? или используется объектив 20х?, но я в этом сомневаюсь. Правда, слабый, малоконтрастный сигнал можно усилить с помощью системы анализа изображения (т.е. программным путем)...
21.12.2011 03:14, Марина, Уфа
Здравствуйте, Ольга Владимировна, Планируем проведение иммуноцитохимических исследований, окраска золотом-серебром. Остановились на световом микроскопе Axio Imager M1, к которому, как поняли, в отличие от Axio Imager A1 можно присоединить фотокамеру и есть дисплей управления. Какими характеристиками отличаются от М1 модели D1 и Z1? И еще. Какую камеру лучше выбрать AxioCam MRc5 или AxioCam ERc 5s? Вроде бы вторая может работать без подключения к ПК. Хотелось бы иметь достаточно простую в использовании, но в то же время современную систему. И, если можно, примерную цену этого великолепия. Заранее спасибо за ответ.

Ответ
Сначала хотелось бы отметить, что фирма Carl Zeiss в настоящее время, в соответствии с жизненным циклом модели, выпускает мордернизированный вариант мод. Axio Imager - Axio Imager 2:Axio Imager.A2 LED - микроскоп для исследования в светлом поле проходящего света, имеющего диодный источник света; Axio Imager.A2 и M2 - ручной (А2) и моторизованный (М2) варианты исследовательского класса. Мод.А2 имеет кодированные (предустановленные)настройки управления, позволяет установку блока ApoTome, обеспечивающего послойное оптическое сканирование важное при многоцветной флуоресценции, и сканирующий стол XY , мод. М2, кроме того, что позволяет реализовывать мод. А2, имеет моторизованные элементы управления, в том числе точное (25 nm)перемещение фокусировочного механизма, позволяющее формировать 3D изображение с помощью компьютерных программ и кроме менеджера света, стандартного (отличительного) для всех моделей Carl Zeiss, модель имеет менеджера контраста (контролера контраста, позволяющего его поддерживать и контролировать), возможность установки модуля с двумя TV-моторизованными (настраиваемыми) выходами, сканирующий стол XYZ, возможность чипового определения объективов (система ACR). Действительно, управление микроскопом происходит с дисплея. Кстати, в обеих моделях есть возможность устанавливать бинокулярные насадки с фотовидеовыходами. Хотела бы отметить, что очень редкая модель микроскопа любой фирмы в настоящее время не имеет возможности производить документирование изображения. Любая модель имеет своего двойника с тринокулярной насадкой. Обе модели специалистами Zeiss рекомендуются для научных медико-биологических исследований.Для цитологических и гистологических исследований рекомендуется мод. M2p, совмещающая в себе мод. А2LED и M2 - диодное освещение по Келеру в проходящем свете, моторизация по оси Z, возможность установки блока LSM. Мод. Axio Imager.D2 и Z2 - являются моделями универсального класса : D2 - ручной (кодированный) вариант, Z2 - моторизованный вариант. Например, D2 имеет 6x- или 10x- гнездные моторизованные турели для смены светоделительных люминесцентных блоков и рекомендованы специалистами Zeiss для FISH исследований (многоцветной люминесценции)и для генетических исследований; мод. Z2 позволяет установку блока LSM. В остальном они в чем-то совпадают с мод. исследовательского класса A2 и M2. Касаемо камер. Да, действительно камера AxioCam ERc 5s относится к эконом-классу и может работать (захватывать изображение) без подключения к компьютеру. Вся информация запоминается на SD-карту, которая затем устанавливается на компьютер, как любая флэшка, и с изображением работают в соответствующей программе. Она обеспечивает цвета изображений с разрешением 5 мегапикселей и сохраняет их на карте памяти в экономном и широко распространенном формата SD. Камера работает с помощью двух кнопок: одна обеспечивает захват изображения, в то время как другая выполняет автоматический баланс белого. Правда, я не понимаю зачем это нужно при работе с такими сложными микроскопами - вы же не собираетесь его таскать в поле или из лаборатории в лабораторию, например? AxioCam MRc5 хорошо известна у наших пользователей и зарекомендовала себя с хорошей стороны: 12 различных режимов и до 5 мегапикселей разрешения; благодаря динамическому диапазону 1:1300 и 36 бит RGB глубины цвета создается точность цветопередачи даже тогда, когда сталкиваются с существенными различиями в яркости и отражательной способности объекта. В принципе, все зависит от наличия денег ...
20.12.2011 16:20, Людмила Бойко, г.Калуга
Здравствуйте!Подскажите,пожалуйста,подходит ли микроскоп Микмед-6 для исследования тромбоцитов?

Ответ
Думаю, что увидите то, что требуется по нормативным документам. А для исследовательской работы - я бы все-таки порекомендовала микроскопы Zeiss (AxioLab)или Olympus (CX 31-41).