Весь спектр оборудования
для вашей лаборатории
г. Новосибирск,
ул. Часовая, 6, к. 1
sales@promix.ru
пн-чт с 9:00 до 18:00
пт с 9:00 до 17:00
8 (383) 336-01-66
Оставить заявку

Мир Микроскопии : Вопросы и ответы

Егорова Ольга Владимировна : Вопросы по микроскопии
На все вопросы по микроскопии, методам контрастирования и настройке микроскопов всех типов ответит, а также даст рекомендации по переоснащению и разовым закупкам оптического оборудования кандидат технических наук, эксперт Госстандарта РФ по оптическому приборостроению, член Нью-Йоркской Академии наук, автор серии книг "С микроскопом на "ты" , "Шаг в ХХI век " и "Техническая микроскопия", а также соавтор книг "Компьютерная микроскопия" (Пантелеев В.Г и др.), "Основы цитологической диагностики и микроскопическая техника" (Полонская Н.Ю.), "Световой микроскоп как инструмент в биотехнологии растений" (Круглова Н.Н. и др.), автор более 200 статей по микроскопии и более 10 авторских свидетельств по объективам микроскопа (в соавторстве) ЕГОРОВА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА, (Санкт-Петербург).
08.10.2007 03:52, Машеников Игорь, Белыничи
Каково разрешение идеально настроенного светового микроскопа с объективом наибольшей числовой апертуры?
Можно ли преодолеть критерий Релея при наличии видеокамеры и системы анализа изображения?
Спасибо

Ответ
Теоретическая разрешающая способность определяется знаменитой формулой Аббе : частное от деления длины волны, при которой происходит наблюдение на сумму числовых апертур осветительной системы и объектива микроскопа. Здесь сразу несколько неопределенностей - во-первых, длина волны. Смотрим мы не в узком спектральном диапазоне, а в так называемом "белом" свете. При расчете договорились брать длину волны 550 нм. Во-вторых, сумма числовых апертур. Первое слагаемое определяется числовой апертурой объектива, вернее, оправой фронтального компонента объектива. Второе слагаемое - числовой апертурой осветительной системы, т.е. диаметром открытой апертурной диафрагмы конденсора. Раскрытие определяется выходным зрачком объектива. Если мы говорим об объективе масляной иммерсии, то числовая апертура объектива 100х может быть от 1,25 до 1,45 в зависимости от типа оптической коррекции. Максимальная числовая апертура конденсора в сухом виде равна 0,9. При использовании масла она может быть увеличена до 1,25 или 1,4 в зависимости от типа коррекции конденсора. Обычно теоретическая разрешающая способность объектива 100х рассчитывается из условия числовой апертуры конденсора 0,9 или в формуле учитывается коэффициент 0,61 (допустимое прикрытие апертурной диафрагмы конденсора относительно числовой апертуры объектива), при этом в делителе уже находится только числовая апертура объектива. Т.е. формула принимает вид: 0,61 умноженное на длину волны, и деленное на числовую апертуру объектива. Т.о. 0,14-0,12 мкм - теоретическая разрешающая способность объективов большого увеличения. Несколько другая зависимость при использовании камер, где разрешение связано с ПЗС матрицей, т.е количеством пикселей. Наилучшим для объективов больших увеличений будет камера с разрешением 1280х1024 пикселей, т.е. камера среднего разрешения. Надо помнить, что система анализа изображения (разрешение камеры, разрешение монитора, программная обработка изображения)это дополнительные устройства, способны подметить и зафиксировать изображение, созданное микроскопом, в пределах ограниченных глубиной резкости, которую может зафиксировать матрица. Глаз может подметить нюансы в изображении в пределах глубины резкости микроскопа за счет аккомодации глаза и среагировать не только на изменение интенсивности, как это делает камера, но и на глубинные эффекты. Однако мы можем "домыслить", а камера зафиксирует то, на что она "обучена". И в то же время, при работе с камерой мы можем фиксировать небольшие перефокусировки и с помощью программы "сшить " изображение по глубине, таким образом "уйти" от фоновых засветок (снижения контраста за счет рассеянного света). Глазом мы это сделать не можем. Поэтому прикрываем осветительную апертуру, уходя от теоритической разрешающей способности. В любом случае на сегодня система анализа изображения с правильно подобранной камерой; микроскопом по классу не ниже лабораторного; с план оптикой, имеющей флюоритовую составляющую; с конденсором ахроматической - апланатической коррекции и осветительной системой 50-100Вт, а также препаратом на предметном стекле 1,1 мм и иммерсионным маслом, соответствующим стандарту, позволят приблизится к теоретической разрешающей способности. Заметьте, все о чем мы говорили относится к проходящему свету светлому полю. С люминесценцией другая история.
07.10.2007 23:05, , Вопрос
Сколько стоит любой электронный микроскоп увеличением в 1000000раз

Ответ
от 600 тыс. Евро до 2500,0 тыс. Евро, если говорим о более или менее приличном. Все зависит от комплектации и типа. Есть дешевле - электронный микроскоп г. Сумы, Украина. Если нужна более серьезная информация пишите на мой адрес egorova-ov@mail.ru
28.09.2007 16:22, Стрюков Павел Олегович зав КДЛ, СПб
Уважаемая Ольга Владимировна!
Приобрел объектив ОПА-5. установил на микмед-1. Однако ожидаемого качества изображения не получил. В микрофотографиях (сделанных с помошью вебкамеры Логитеч 6 (без объектива), установленной на укороченную до 2 см монокулярнуюнасадку (без окуляра) отчетливо видимм радужный контур.
Расскажите пожалуйста подробнее об отечественной оптике на бесконечность. В чем ее конструктивное отличие? Достаточно ли для улучшения изображения на матрице вебкамеры приобрести объектив на бесконечность? Или необходимы капитальные затраты... Спасибо

Ответ
Уважаемый Павел Олегович! Мне очень жаль, что ваш микроскоп не позволяет получить качественное изображение. Но на вашем микроскопе данный объектив будет работать очень плохо. Скорее всего это может быть связано с несовпадением плоскости изображения с плоскостью камеры, а также с одним из существенных параметров - осветительной системой. Штатив микроскопа МИКМЕД 1 конструктивно обеспечивает конечную длину тубуса объективов 160 мм. Плоскость изображения в этом микроскопе находится четко на расстоянии 13 мм ниже среза окулярной трубки (без окуляра). 147 мм обеспечивается расстоянием от опорной плоскости объектива (край гнезда под объектив в револьверном устройстве) до плоскости изображения. Из объектива выходит сходящийся в плоскости изображения пучок света, который и строит изображение. Объектив планапохроматический ОПА 100х1,30МИ, обладая большой числовой апертурой требует хорошей осветительной системы. Кроме того, объектив имеет хроматическую разность увеличения 2%. Т.е. это та аберрация, которая отвечает за цвет и контурную окраску.
На ваш вопрос по длине тубуса "бесконечность".
В объективах, рассчитанных на длину тубуса "бесконечность" после объектива выходит параллельный пучок, который формирует изображение на "бесконечность". Для того, чтобы "рассмотреть" изображение окуляром необходимо получить это изображение в плоскости изображения (расположенной на расстоянии 10-13 мм ниже среза окулярной трубки, как и в микроскопе с конечной длиной тубуса). Для этого после объектива на конструктивно удобном расстоянии устанавливается тубусная линза, которая превращает параллельный пучок света в сходящийся.
Можно было бы установить такие объективы и на микроскопы с конечной длиной тубуса Однако в этом случае надо заказать тубусную линзу с фокусным расстоянием 160 мм . Единственный минус - может не хватить рабочего расстояния, т.к. в микроскопах с конечной диной тубуса высота объективов может быть старой (33 мм,как в МИКМЕД 1) и новой (45 мм). Тубусная линза в оправе имеет толщину порядка 10-15 мм. Т.е. общее расстояние от опорной плоскости гнезда револьверной головки до плоскости предметного стола должна быть не менее 56-60 мм.
Преимуществом объективов с длиной тубуса "бесконечность" является нечувствительность по качеству изображения на появление входе лучей каких-либо оптических элементов (пластин, призм, клина и .т.д.)
19.09.2007 16:43, Евгений, москва
Уважаемая Ольга Владимировна!
Я хочу приобрести ртутную лампу для микроскопа Olympus IX 50. Подскажите пожалуйста, где её можно найти

Ответ
Лампы от микроскопов фирмы Olympus можно запросить в двух фирмах, расположенных в Москве: фирма ООО "ИНТЕРГЕН" тел. 495-506-41-20 e-mail: olympus.bio@gmail.com и фирма ООО "Химинст" тел.факс: 495-937-5026 e-mail:info@cheminst.ru. Если не в одной, то в другой обязательно будет.
17.09.2007 20:26, , Вопрос
стоимость микроскопа

Ответ
от 60 Евро до 1 млн Евро и более, с учетом электронного, который еще больше. Каков вопрос - таков ответ:))) А если серьезно - это не вопрос, т.к. мир микроскопов разнообразен, поэтому не удивляйтесь такому разбросу.
09.08.2007 15:07, Луконин Алексей Михайлович, г.Уфа
Уважаемая Ольга Владимировна!
Посоветуйте недорогую систему для тёмнопольной микроскопии (гемотестирование.
Заранее благодарен.

Ответ
Для того, чтобы вам что-то посоветовать надо, прежде всего, знать на базе какого микроскопа вы будите устанавливать темнопольный конденсор и с каким комплектом объективов вы будите работать. Темное поле можно реализовать тремя способами. И, естественно, стоимость их будет отличаться, от 100 Евро (вставка) до 3 тыс Евро -универсальный конденсор с откидными головками для образования темного поля с высокоапертурными объективами (сухой и иммерсионный). Зайдите на сайт http://www.mspiter.ru (Принадлежности, поз 4) Там указан перечень вопросов, на которые необходимо вам ответить, после этого вы получите стоимость комплекта.
08.08.2007 17:45, tamara, Russia
Уважаемая Ольга Владимировна!

Я намерена преобрести портативный видео кольпоскоп фирмы UVAROV Ltd.(http://www.uvarov-optics.com/en/13.html).
техничесская характеристика:
Basic Package
Optical video camera head with precise adjustments
LED light source
Colour LCD monitor with remote control with PC bush
Solid portable tripod
Noble Suitcase
Technical characteristics
Magnification - 6x to 17x
Working range - 230 to 450 mm
Field of vision - 10 to 30 mm
Camera definition - 320 TV lines
Light source LED - 3W
Diameter of the lighted field - 40 to 50 mm
Monitor TFT - LCD 8"
Package weight - 5 kg

Меня интересует соответствует ли эти параметры современным требованиям и что вы посоветуете вообше.

с уважением Тамара

Ответ
Кольпоскопы делятся на два класса: диагностические и операционные. Диагностические кольпоскопы имеют увеличение до 20х, операционные - 30-40х. Кроме увеличения и качественного освещения, они еще отличаются штативами.
Современные кольпоскопы, как и стереомикроскопы, имеют плавную смену увеличения. Если кольпоскоп имеет ступенчатую смену увеличения, как, например, отечественные на базе МБС 10, то это уже несколько устаревшая система. Однако она позволяет удешевить прибор и это признак диагностического прибора, стоимость которого может быть 2,5-3,0 тыс. Евро.
Параметры разрешения камеры для диагностических видеокольпоскопов лежит в пределах 350-400 ТВ линий.
Я уточнила у фирмы стоимость рассматриваемого кольпоскопа - она вполне соответствует назначению этого прибора, как диагностического. К сожалению, о качестве изображения этого кольпоскопа я ничего не могу сказать. Фирма достаточно известная, надеюсь...
Что касается кольпоскопов, приближающихся к операционным (увеличение до 35х), то из достаточно дешевых можно назвать кольпоскоп-видео Camscope DCSM-102 (Япония - Ю. Корея) с продажной ценой почти в 1,5 раза выше. Zeiss предлагает диагностический кольпоскоп Е (увеличение до 16х, ступенчатая смена увеличения ) без камеры, но есть возможность документирования, при этом стоимость даже без документирования - выше рассматриваемого . Оптика, конечно,...цейссовская.
24.05.2007 04:20, Вадим, Тирасполь
Уважаемая Ольга Владимировна!
Подскажите пожалуйста, что означает маркировка (S) 40х и (S, Oil) 100х объективов микроскопа? Микроскоп китайский, xsz-n107.
Большое спасибо.

Ответ
Уважаемый Вадим, маркировка на корпусе объектива является визитной карточкой качества микроскопа. На корпусе по стандарту ISO наносится следующая маркировка в соответствии с рядом: 1-ый ряд - фирма-производитель; 2-ой ряд - тип оптической коррекции объектива (качественная составляющая микроскопа - планахромат, апохромат, планапохромат, план-неофлюар и т.д.); 3-ий ряд - увеличение/числовая апертура (параметрические характеристики микроскопа); 4-ый ряд - длина тубуса микроскопа/условие работы объектива (с покровным стеклом, без покровного стекла).
Вы указали тип объектива или тип оптической коррекции "S" и увеличение 40х и 100х, при этом объектив 100х работает с масляной иммерсией "Oil". Тип оптической коррекции "S", если он не сопровождается каким-либо еще словом (см. расшифровку 2-го ряда маркировки), может обозначать, что данный объектив является ахроматическим, т.е. вся корректировка по качеству изображения осуществляется для одной длины волны – зеленой. Но это объектив не плоского поля, иначе присутствовало бы слово Plan. В то же время, тип оптической коррекции обозначен, пусть даже и одной буквой. Это значит, что данные объективы отличаются от простых ахроматов. Т.е. качество, создаваемое ими изображения , улучшено по полю - изображение по полю более плоское. Таким образом, это обычные ахроматические объективы с улучшенной корректировкой по полю - при точной фокусировке объектива на препарат в изображении будет наблюдаться следующая картина - центр и периферия будут видны четко, однако по краю может наблюдаться дефокусировка (размытость) изображения. По качеству они близки к объективам от микроскопа от МИКМЕД 1.
18.05.2007 10:23, Дюсембаев Еркен, Казахстан, Астана
Организация имеет намерение приобрести микроскопы фирмы Карл Цейс или Олимпас. В связи с чем, просит выслать прайс лист на тринокулярные, люминесцентные, флуороскопические микроскопы фирм, условия поставки, гарантии и постгарантии, обучения/стажировки техперсонала персонала, др.опции

Ответ
В моей книге "С микроскопом на "ты". Шаг в XXI век" даются тестовые вопросы для закупок разных типов микроскопов. Для нас с вами должно быть важным, чтобы микроскоп мог решить соответствующие задачи. Для приобретения люминесцентного (название микроскопа в отечественной практике)или флуоресцентного микроскопа (змикроскопы зарубежного производства) целесообразно ответить на следующие вопросы:
тип микроскопа - прямой или инвертированный (перевернутый);
класс микроскопа (рабочий - галогенная лампа 6В 20-30 Вт, ртутная - 50Вт, лабораторный - галогенная лампа 12В 35 Вт, ртутная - 50Вт или 100Вт, исследовательско-универсальный - галогенная лампа 12В 100 Вт, ртутная - 50Вт или 100Вт);
набор объективов - 2,5х; 4-5х; 10х, 20х, 40х, 50хМИ,63х или 100х или это комплект специальных объективов водной ииммерсии или масляной иммерсии;
набор блоков люминесцентных светофильтров (запирающих и возбуждающих);
- методы контрастирования, обычно сопутсвующие люминесценции - фазовый контраст, варел-контраст, дифференциально-интерференционный контраст (необходимо указать увеличение объективов для реализации соответствующего метода контрастирования) .
Вот только после ответа на эти вопросы можно говорить о цене. Стоимость люминесцентных микроскопов увеличивается в зависимости от объективов и блоков светофильтров,типа и класса микроскопа, мощности ртутной лампы. В среднем люминесцентный микроскоп стоит от 9 тыс. Евро(с минимумом оптики, блоков светофильтров и мощности галогенной и ртутной лампы) до 60 тыс. Евро (с учетом методов контрастирования, моторизованной системы управления, специальных программ анализа изображения). При сравнении стоимости микроскопов разных фирм, но одного класса сложности и качества оптики (обратите внимание на это!) все они находятся практически в одной ценовой нише.
11.05.2007 13:46, Инженер Черкасов А. В., г. Благовещенск
Подскажите пожайлуста какая смазка используется для микровинта микроскопа ЛОМО МИКМЕД-5

Ответ
На ЛОМО мне сообщили, что для микроскопов МИКМЕД 5 и МИКМЕД 6 используется смазка американского производства (фирма NYC, США). Для скальзяцих поверхностей - смазка NEOGEZ 774, для резьбовых соединений - NEOGEZ 779
19.04.2007 00:02, , Вопрос
Добрый день, интересует темнопольная микроскопия по капле крови, самые последние разработки и по надежности и легкости в работе? Какую фирму выбрать? Олимпус сх-41? Или есть варианты, срочно, для приобретения в мед.центр, Благодарю.

Ответ
Для работы по методу темного поля для исследования капли крови подойдет любой биологический микроскоп, с помощью которого можно реализовать метод темного поля с объективом масляной иммерсии 100х. Микроскоп должен обеспечивать настройку освещения по Келеру (регулируемые полевая и апертурная диафрагмы; узел крепления конденсора должен быть регулируемый, т.е. иметь фокусировочное движение вверх-вниз и конденсор должен центрироваться с помощью центрировочных винтов). Для этих целей может подойти микроскоп, например, типа Axiostar Plus (Цейсс) с иммерсионным темнопольным конденсором. Кстати, в Тюмени я была в медицинском центре, где меня попросили посмотреть микроскоп для указанных целей. К сожалению, для уменьшения стоимости микроскопа в качестве конденсора использовался универсальный конденсор для одновременного использования по методам светлого поля, фазового контраста и темного поля (с небольшой числовой апертурой), что не позволило получать качественную картинку при работе с объективом 100х. И еще. Для скрининга необходимо иметь систему документирования. Мне, например, отдали кассету с отснятым видеороликом. И это правильно. Насколько я понимаю, для этой методики важным является постоянный контроль за состоянием крови.
Таким образом, микроскоп должен быть по классу не ниже рабочего, с настраиваемым освещением по Келеру, с объективом 100х, темнопольным иммерсионным конденсором, фотовидеовыходом и системой документирования (для фотографирования или для съемки динамических процессов).
18.04.2007 11:20, Гохран Нацбанка Республики Казахстан, город Алматы
В 1999 году фирма ААВ Индустри унд Электротехник согласно контракту с Национальным Банком Республики Казахстан был поставлен в хранилище (сейчас он называется «Центр кассовых операций и хранения ценностей» ) микроскоп Stemi SV 11. Однако он не был оборудован микрометром. Сейчас мы очень нуждаемся в этом микрометре и хотели спросить у Вас как можно доукомплектовать (микрометром) этот микроскоп.

Ответ
На ваш запрос сообщаю следующее. В настоящий момент микроскоп Stemi SV 11 снят с производства, однако я думаю, что в вашем случае помочь можно. Для этого вам необходимо обратиться в представительство фирмы Цейсс в Алмате (Тищенко Владимир tischenko@zeiss.kz) , сообщить увеличение окуляра и его линейное поле (например, 10х/21 или 10х/23 или 16х/16 или 25х/8) и заводской номер, который нанесен на корпус окуляра ( начинается с цифры 45...). Разумнее всего, купить окуляр с сеткой соответствующего увеличения и линейного поля , а также специальный объект - микрометр для стереомикроскопов, что необходимо для подтверждения правильности произведенных измерений.
09.03.2007 22:01, Твердикова Людмила Николаевна, Узбекистан г,Ташкент
Уважаемая Ольга Владимировна!Можете ли ВЫ дать информацию о кольпоскопах фирмы Карл Цейс,если можно о более современных моделях с монитором и возможностью хранить информацию о данных исследований.
гинеколог Твердикова Л.Н.

Ответ
Уважаемая Людмила Николаевна! Фирма Цейсс предлагает 2 модели кольпоскопов, имеющие возможность документирования, т.е. имеющие фото-видеовыход для установки камеры: дешевый кольпоскоп Е (постоянное увеличение 5х и сменное - 3х-5х-8х с рабочим расстоянием 300 мм) и более сложная модель 150FC (увеличение сменное 4х-6х-10х-16х-25х, рабочее растояние 250 мм и 300 мм). Последний кольпоскоп имеет возможность установки на нем лазера CO2 и возможность дооснащения интегрированной видеокамерой. Честно говоря, в России есть фирмы, которые дооснащают эти кольпоскопы видеосистемами (камера, монитор) и программами документирования (банк изображений с комментариями или измерениями). Я знаю, что это, по просьбе заказчиков, делает санкт-петребургская фирма - разработчик "Зенит", занимающаяся видеокамерами. Есть опыт в подобных дооснащениях и у другой питерской фирмы - "ВидеоТест", занимающейся системами анализа изображения.
03.03.2007 22:20, Рогозина Елена, Институт Растениеводства им. Н.И. Вавилова
Пожалуйста, подскажите марку микроскопа пригодного для изучения пыльцы растений, хлоропластов в клетках листа и морфологии хромосом растений. Ранее использовали микроскопы с объективом масляной иммерсии, увеличение 100.

Ответ
Для решения ваших проблем подойдут любые микроскопы, класса не ниже рабочих (с возможностью настройки самим микроскопистом освещения по Келеру), с планахроматическими объективами. Можно назвать такие пограничные модели, как Axiostar Plus (Carl Zeiss), CX 41 (Olympus), DM 1000 (Leica). По райней мере микроскоп должен быть не ниже по классу и соотношению "цена-качество" приведенных моделей. В противном случае вы проиграете в разрешении, что для ваших целей плохо. Эти же микроскопы могут хорошо работать с цифровыми фотоаппаратами. Хотя с иммерсионным объективом 100х качество съемки будет несколько хуже, чем с цифровой видеокамерой. Если вы захотите использовать автоматическое кариотипирование, например, или использование систем анализа изображения,например, для создания банка данных хромасом растений, то класс микроскопа должен быть выше. Например, это должны быть уже лабораторные модели Axioskop 40 (Carl Zeiss), СX 51 (Olympus), DM 2500 (Leica).
08.02.2007 21:08, Tiruhi, iz Armenii
chto takoe polyarizacionnaya mikroskopiya

Ответ
Ответ на этот вопрос простой и сложный одновременно. Изменение ориентации вектора света естественным (связанное со свойством объекта - анизотропия) или искусственным (с помощью поляроидов)путем. Анизотропия минералов обусловливается особенностями решетки.
Анизотропия - различное значение физических свойств горных пород и минералов по разным направлениям; характерна для слоистых горных пород, а также для пород с неравномерной структурой.
Для биологических объектов это свойство проявляется в волокнах (например, оценивается ранняя стадия инфаркта миакарда), используется в патанатомии и т.д. Поляризованный свет формируется по-разному в микроскопах проходящего и отраженного света. В проходящем свете требуется поляроид (анализатор), расположенный в визуальной насадке и поляроид (поляризатор), расположенный в конденсоре. В отраженном свете один поляроид устанавливается в осветительной системе, второй - в светоделительном блоке. Поляризационные микроскопы бывают простыми - для обнаружения и контрастирования объекта, и точными - для измерения и оценки свойств поляризующих элементов. Во втором случае все оптические элементы (объектив, конденсор и, в определенных случаях, окуляр) должны быть специализированными с маркеровкой Pol.
Более подробно о поляризационных микроскопах можно узнать в моих книгах 1) для биологов и медиков "С микроскопом на "ты ". Шаг в XXI век " (изд. Репроцентр - М, Москва, моб. 8-903-762-20-61, Валентина Михайловна, reprocentr@mtu-net.ru) и
2) для материаловедов и геологов "Техническая микроскопия " (изд. Техносфера, Москва, knigi@technosphera.ru)