Мир Микроскопии : Вопросы и ответы

Здравствуйте
Ольга Владимировна,
благодарю Вас за ответ!

рекомендуемые Вами микроскопы я посмотрел, но вот какой вопрос меня мучает:

в описании одного китайского микроскопа, не знаю какой фирмы но называется BМ-100М написано, что он может увеличивать и не прозрачные, объемные предметы, и хотя по своим характеристикам от большинства моделей он не отличается, не понятно как он это делает?

мне объяснили, что вроде бы он может освещать объекты прямо через объектив???

хотя микроскопы которые предназначены для увеличения непрозрачных объектов, вроде бы не могут работать с прозрачными и наоборот...

в общем, простите, но я в конец запутался,
прошу Вас внести ясность, или если это слишком затруднительно для такого делетанта в этом вопросе как я, то просто посоветуйте конкретную модель для моего ребенка, пожалуйста!

с уважением.

Уважаемый Виталий! Я посмотрела этот микроскоп. Нормальный биологический микроскоп, правда монокулярный, что не очень хорошо, т.к. глаза начинают портиться именно с момента большой нагрузки на один глаз. Кроме того, подключить фотокамеру вы не сможете - нет дополнительного выхода для крепления фотоаппарата. Касаемо отраженного света. Навряд ли ваш ребенок будет смотреть при большом увеличении. Обычно это увеличения объективов 4х и 10х (максимум) - бабочки, мухи, головастики… .Эффект отраженного света (т.е. в данном случае - падающего света) в подобных микроскопах создается за счет установки вблизи объекта обычной настольной лампы или осветителя, или фонарика, таким образом объект непрозрачный освещается сбоку, лучи отражаются от него и попадают в объектив. 4х и 10х вполне могут работать в подобных условиях (за счет достаточно большого рабочего расстояния и возможности работать с препаратами без покровного стекла). И все-таки для отраженного света я бы порекомендовала купить цифровой макроскоп DS2 (Motic) со встроенным фотоаппаратом , он работает в падающем свете и стоит 8 тыс. руб. – он монокулярный, но с экраном монитора компьютера –это уже не так страшно.
Микроскопы отраженного света ( освещение объекта через специальный безрефлексный объектив) применяются в основном для металлографии или материаловедения. В биологии используются люминесцентные микроскопы отраженного света , но их стоимость лежит в пределах 7-10 тыс. Евро.
Я могу вам порекомендовать купить все-таки 2 микроскопа – один для работы с прозрачными объектами, аналогичный тому, что вы выбрали (все-таки лучше бинокулярный или цифровой) и макроскоп. Стоить это будет не более 2 тыс. дол., то, что вы и хотели.

ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА,
здравствуйте!

ищу микроскоп в подарок для дочери, 12 лет, серьезно увлеклась микромиром, (в школе ходит на факультативные занятия)

я в этом деле так особо и не разобрался, хотя тщетно потратил много времени пытаясь сам выбрать микроскоп в интернете

поэтому очень прошу Вас не оставлять мою просьбу без внимания!

приоритеты в аппарате такие:

1. с хорошим качеством изображения (не хочу чтобы дочь испортила зрение)
2. возможность рассматривать непрозрачные объекты и прозрачные
3. возможно с подключением цифровой камеры есть Canon PowerShot S50 и Panasonic Lumix DMC-LX2
4. цена не дороже 2000$
5. желательно покупка по почте

с уважением.

Уважаемый Виталий! Мы с вами спишемся,но для тех, кто читает вопросы-ответы могу сказать следующее. Для детей,серьезно (!)увлекающихся биологией или зоологией, как ни странно, целесообразно покупать нормальные биологические микроскопы класса ЭКОНОМ. В последнее время появились так называемые "цифровые микроскопы" со встроенным цифровым фотоаппаратом или дешевой цифровой камерой. В каких-то случаях это дешевле, чем покупать микроскоп с тринокуляром и камерой. Например, на сайте http://www.moticam.ru можно выбрать и купить микроскоп по почте. Микроскопы есть и стереоскопические для проходящего и падающего света (для зоологии). Есть цифровые макроскопы с увеличением 20х и большим рабочим расстоянием - можно препарировать или что-то делать под микроскопом. Если есть компьютер, то цифровые микроскопы могут и не быть бинокулярными. Достаточно иметь монокулярный микроскоп с выводом изображения на экран монитора. По крайней мере, подобные микроскопы имеют диски с элементарными программами, что является серьезной подготовкой к современным технологиям в медико-биологических микроскопических исследованиях с использованием анализа изображения. И потом это интересно - научиться обрабатывать изображение, создавать альбом изображений, что-то имерять и описывать и через принтер - распечатывать. Желаю успехов вашему ребенку и буду рада, если он пополнит ряды микроскопистов.

Уважаемая Ольга Владимировна! Здравствуйте!
Меня интересует люминесцентный микроскоп и микроспектрофлуориметр для регистрации спектров люминесценции в области 450-700 нм.Цены и комплектация. Где находятся торговые представители фирмы в С-Пб? Спасибо!

Уважаемый Владимир Евгеньевич! Я пыталась найти среди разных фирм ответ на ваш вопрос. К сожалению выбор не очень большой. Это ООО ЛОМО-ФОТОНИКА с нашими модернизированными МСФУ-Л (ailopatin@gmail.com) и польская фирма Kawaska (marian.kawczynski@kawaska.com) - они являются эксклюзивными продавцами микроскопектронасадок фирмы Карл Цейсс.

Что вы можете сказать о микроскопах фирмы Motic -B3, BA 300 и ВА 400?

Китайская фирма Motic является относительно новой на нашем отечественном рынке световых микроскопов. Однако апробация таких биологических микроскопов, как ВА 300 и ВА 400 показала их достаточно высокое качество изображения для эконом класса (51-90 тыс. руб. полной комплектации) , устойчивость конструкции . Важно, что освещение по Келеру настраивается , а не предустановлено, что важно при работе с цитологическими препаратами. Причем качество узлов фокусировки и центрировки конденсора, а также регулировки полевой диафрагмы достаточно надежные в работе. Микроскопы рассчитаны на длину тубуса "бесконечность" и скорректированы по цветным искажениям (ХРУ=0%), комплектуются разными объективами, в том числе и достаточно дешевым планахроматом 60х. Реализуются методы фазового контраста, темного поля (до 40х) и поляризация. Это, конечно, не рабочие микроскопы высокого класса, как Аксиостары, но в своей ценовой категории вполне могут быть рекомендованы к использованию в рутинных работах гистологических лабораториях и лабораториях КДЛ (info@opticalsys.ru).

Уважаемая Ольга Владимировна!
Какую модель микроскопа Вы посоветовали бы приобрести- бинокуляр с ахроматическим объективом, микрометром с сеткой 10мкм и увеличением до 500.Использование измерений для контроля качества лекарственных препаратов

Вам подойдет любой биологический микроскоп проходящего света (если речь идет о гранулах или порошках) , имеющий окуляр 10х (16х) с микрометром (оцифрованной линейкой), можно с мелкой сеткой; и ПЛАН-ахроматические объективы: 40х - стандартный и поисковый (обзорный) - 10х .
Лучше, если микроскоп будет настраиваться по Келеру (есть возможность регулировать освещенность в плоскости предмета, глубину просматриваемого слоя, а также стандартизовать условие наблюдения, что очень важно во время технологических процессов - в частности, при работе по контролю ).
Есть еще одна тонкость - ваша технология предусматривает работу под покровным стеклом? Если "да", то объектив стандартный, рассчитанный на работу с покровным стеклом. Если объекты наблюдения НЕ покрыты покровным стеклом, то рекомендуется заказать либо биологический объектив 40х без покровного стекла, либо безрефлексный объектив Epi 50х из металлографического микроскопа. Можно рекомендовать микроскопы СХ 41 (Олимпус), Eclips 200 (Никон), Axiostar Plus (Карл Цейсс), DM 2500 (Лека), МС 300 (Микрос), BA 300 (Мотик). Это микроскопы имеют высокое качество изображения для подобного рода работ.
Все остальные (классом ниже) будут иметь малое разрешение и не четкую картину, а также может нарушаться повторяемость результатов наблюдения по геометрическим размерам и по цвету во времени. Боюсь только, что в комплект микроскопов Мотик и Микрос могут не входить объективы без покровного стекла.
С другой стороны, я знаю, когда, контроль лекарственных препаратов проводили с помощью такого метода контрастирования, как фазовый контраст. А вот при исследовательских работах по лекарственным препаратам, работа велась на микроскопах классом значительно выше ( исследовательских микроскопах) с применением рельефного контраста (ДИК) и систем анализа изображения.
На самом деле, важно знать этап технологического процесса, на котором происходит контроль качества, и в чем он заключается (контроль формы, цвета, размера).

Уважаемая Ольга Владимировна! Ошеломлен Вашим профессионализмом. Помогите ради Христа! Мне нужна информация о микроскопах (световых, электронных), которые фигуривали в передовых генетических лабораториях мира в начале-середине шестидесятых годов xx века (хромосомные исследования). Их харакетиристика, усройство, принцип работы. Если Вы не сможете помочь мне, то подскажите, где в Интернете я могу достать эту информацию?

Уважаемый Владимир Иванович, спасибо вам за ваши слова. К сожалению, прямо "с ходу" я не могу вам ответить. Мне необходимо время, чтобы кое-что уточнить. Могу только сказать, что отечественные генетики, скорее всего, работали на микроскопах серии МБР (микроскоп биологический рабочий) и МББ (микроскоп биологический большой), а также на микроскопах фирм Leitz, Zeiss, Reichert. Чуть позже появились МБИ и среди них инвертированный микроскоп МБИ13 и Opton… Но я постараюсь уточнить и вам переслать. К сожалению, сайты http://defacto.examen.ru и www.bionet.nsc.ru скорее посвящены истории самого вопроса, а не истории оборудования.

А чем лучше и правильно удалять иммерсионное масло с объектива?

Чистка оптики вопрос очень важный и оказывается не таким простым. Рекомендуемые в инструкциях зарубежных микроскопов жидкости : смеси из эфира и спирта; бензин (авиационного, чистого) или спирт. И спирт, и бензин достаточно агрессивные среды, поэтому основной девиз при чистке фронтальных компонентов объективов:"Знай меру". В книге "С микроскопом на "ты". Шаг в XXI век" (2006) я привожу подробную схему чистки оптики с фотографиями.
Мне нравиться больше чистить 94-96% спиртом : первый этап - поверхность линзы протирается чуть влажным (!) тампоном движением от центра к краю; второй этап (так называемая «классическая протирка оптических осей») – необходимо дыхнуть на поверхность линзы и сухим тампоном еще раз протереть линзу движением от центра к краю. Фронтальный компонент иммерсионного объектива обычно не имеет просветляющих покрытий и поэтому для чистки достаточно двух этапов. Однако, целесообразно каждый день по окончанию работы протирать (промокать) фронтальную линзу батистовой или фланелевой тряпочкой. И помним, что иммерсионная жидкость по вязкости должна соответствовать ГОСТу.
Другое дело – фронтальные компоненты сухих объективов (10х, 20х или 40х). Во-первых, они больше по диаметру, и, во-вторых, имеют просветляющее покрытие. В этом случае смесь спиртоэфирная становится источником дополнительного загрязнения, появления интерференционных полос. При повторной чистке можно неумелой рукой испортить слой покрытия, что приведет к снижению контраста. В этом случае чистый спирт становится более удобным средством для чистки. Но опять-таки – чуть влажный тампон! И не трите сильно поверхность! Отсюда вывод – стараться не опускать эти объективы в иммерсионное масло. Если случилась такая беда , то надо иметь специальную проспиртованную тряпочку (бумагу), которая продается в магазинах для чистки оптики (в т.ч. фотообъективов), но не стекол!. И ею сразу протереть (промокнуть) поверхность.
Тампон необходимо делать из медицинской ваты на деревянной (!) палочке из маникюрного набора. Палочка имеет длину 7-10 см , диаметр 2-3 мм и заострение с одного конца, с другого - скошенная плоская поверхность. Будьте внимательны и осторожны. Не давите на поверхность линзы!

Добрый день!
Подскажите, пожалуйста, какой микроскоп из ниже перечисленных обладает максимальным набором функций? качество оптики и соответствует оптимальному соотношению цены/качества:
PrimoStar (Zeiss), MC 50 (Micros), MC 300 (P), MC 300 (S).
И в чём их принципиальное различие.
Заранее благодарен.

Указанные Вами микроскопы относятся к двум группам. Я бы их сгруппировала следующим образом: группа 1 ( учебно-рабочие модели) - PrimoStar (Zeiss) и MC 50 (Micros) ; группа 2 (рабочие модели)- Axiostar Plus (Zeiss) и MC 300 (P – с фотовыходом), MC 300 (S - бинокулярный). Вторая группа, относящаяся к рабочей группе микроскопов для рутинных исследований в медико-биологических лабораториях, является наиболее оптимальной по набору функций, качеству оптики и относительно небольшой цене. Оба микроскопа могут реализовать все методы контрастирования (светлое поле, фазовый контраст, темное поле, поляризация, люминесценция). Широкий набор план – оптики от 4х до 100х ( в Axiostar Plus есть еще объектив 2,5х); окуляры 10х с линейным полем 20 мм ( в MC 300 есть еще окуляр 10х с линейным полем 18 мм). Одинаковые источники света 6В 20Вт.
Но есть и различия. В частности, в варианте люминесцентного микроскопа. Здесь неоспоримый приоритет принадлежит Axiostar Plus по всем выходным параметрам.

общий IgE у ребенка 5 лет по результатам анализа больше 2000,0 МЕ/мл, панель аллергенов плесени №1 4,90 МЕ/мл, аскарида меньше 0,10 МЕ/мл, секреторный IgA (сыворотка крови) 6,37 мг/мл что с ребенком

Уважаемая Оксана, я не являюсь врачом, поэтому не могу вам дать ответа.
Уважаемые господа врачи!
Если кто может ответить на этот вопрос прошу ответить по эл. почте OFedorova@ecobl.omsknet.ru
Заранее благодарю.

Скажите, пожалуйста, какими дополнительными параметрами должна обладать камера для микроскопа при съёмке флуоресцирующих обектов?Что значит накопление сигнала? Для чего нужно охлаждение матрицы? Если мы будем снимать неподвижные (фиксированные, заключенные) препараты, можно ли добиться усиления сигнала увеличением экспозиции? Спасибо!

При люминесцентном свечении мы наблюдаем следующую картину - черный фон и точечное или структурное свечение препарата, яркое или слабосветящееся. Это при условии, что нет фоновой засветки от не промытого препарата, плохого люминесцирующего масла, если лампа не отцентрирована, объективы имеют собственную люминесценцию. Фоновая засветка, рассеянный свет увеличивает так называемый шумовой эффект. Фоновая засветка может исказить результат наблюдения.
Для того, чтобы камера смогла это зафиксировать, она должна свечение, т.е. интенсивность свечения "почувствовать", распознать среди других элементов объекта, которые не светятся. Т.о. камера для люминесцентных исследований должна обладать высокой чувствительностью. Кроме того, немаловажным является шумовые характеристики камеры. Для снижения уровня шумов камера должна иметь встроенную систему охлаждения
Увеличение экспозиции, т.е. время, за которое должно произойти накопление сигнала при люминесцентных исследованиях в любом случае существует, т.к. это сродни засвечиванию фотослоя при съемке фотоаппаратом. Ибо каждый пиксель матрицы должен получить информацию со своего участка объекта, математически обработать и создать общую картинку. На самом деле существует порог чувствительности, как и в фотопленке.
Задачи люминесцентной микроскопии обычно решают высокочувствительными монохромными камерами, с последующим цветокодированием.
А вы пробовали закрывать числовую апертуру люминесцентного осветителя? И еще может быть мощность вашей ртутной лампы недостаточна? Проверьте технологию приготовления препарата. Все это факторы, влияющие на интенсивность свечения.

Каково разрешение идеально настроенного светового микроскопа с объективом наибольшей числовой апертуры?
Можно ли преодолеть критерий Релея при наличии видеокамеры и системы анализа изображения?
Спасибо

Теоретическая разрешающая способность определяется знаменитой формулой Аббе : частное от деления длины волны, при которой происходит наблюдение на сумму числовых апертур осветительной системы и объектива микроскопа. Здесь сразу несколько неопределенностей - во-первых, длина волны. Смотрим мы не в узком спектральном диапазоне, а в так называемом "белом" свете. При расчете договорились брать длину волны 550 нм. Во-вторых, сумма числовых апертур. Первое слагаемое определяется числовой апертурой объектива, вернее, оправой фронтального компонента объектива. Второе слагаемое - числовой апертурой осветительной системы, т.е. диаметром открытой апертурной диафрагмы конденсора. Раскрытие определяется выходным зрачком объектива. Если мы говорим об объективе масляной иммерсии, то числовая апертура объектива 100х может быть от 1,25 до 1,45 в зависимости от типа оптической коррекции. Максимальная числовая апертура конденсора в сухом виде равна 0,9. При использовании масла она может быть увеличена до 1,25 или 1,4 в зависимости от типа коррекции конденсора. Обычно теоретическая разрешающая способность объектива 100х рассчитывается из условия числовой апертуры конденсора 0,9 или в формуле учитывается коэффициент 0,61 (допустимое прикрытие апертурной диафрагмы конденсора относительно числовой апертуры объектива), при этом в делителе уже находится только числовая апертура объектива. Т.е. формула принимает вид: 0,61 умноженное на длину волны, и деленное на числовую апертуру объектива. Т.о. 0,14-0,12 мкм - теоретическая разрешающая способность объективов большого увеличения. Несколько другая зависимость при использовании камер, где разрешение связано с ПЗС матрицей, т.е количеством пикселей. Наилучшим для объективов больших увеличений будет камера с разрешением 1280х1024 пикселей, т.е. камера среднего разрешения. Надо помнить, что система анализа изображения (разрешение камеры, разрешение монитора, программная обработка изображения)это дополнительные устройства, способны подметить и зафиксировать изображение, созданное микроскопом, в пределах ограниченных глубиной резкости, которую может зафиксировать матрица. Глаз может подметить нюансы в изображении в пределах глубины резкости микроскопа за счет аккомодации глаза и среагировать не только на изменение интенсивности, как это делает камера, но и на глубинные эффекты. Однако мы можем "домыслить", а камера зафиксирует то, на что она "обучена". И в то же время, при работе с камерой мы можем фиксировать небольшие перефокусировки и с помощью программы "сшить " изображение по глубине, таким образом "уйти" от фоновых засветок (снижения контраста за счет рассеянного света). Глазом мы это сделать не можем. Поэтому прикрываем осветительную апертуру, уходя от теоритической разрешающей способности. В любом случае на сегодня система анализа изображения с правильно подобранной камерой; микроскопом по классу не ниже лабораторного; с план оптикой, имеющей флюоритовую составляющую; с конденсором ахроматической - апланатической коррекции и осветительной системой 50-100Вт, а также препаратом на предметном стекле 1,1 мм и иммерсионным маслом, соответствующим стандарту, позволят приблизится к теоретической разрешающей способности. Заметьте, все о чем мы говорили относится к проходящему свету светлому полю. С люминесценцией другая история.

Сколько стоит любой электронный микроскоп увеличением в 1000000раз

от 600 тыс. Евро до 2500,0 тыс. Евро, если говорим о более или менее приличном. Все зависит от комплектации и типа. Есть дешевле - электронный микроскоп г. Сумы, Украина. Если нужна более серьезная информация пишите на мой адрес egorova-ov@mail.ru

Уважаемая Ольга Владимировна!
Приобрел объектив ОПА-5. установил на микмед-1. Однако ожидаемого качества изображения не получил. В микрофотографиях (сделанных с помошью вебкамеры Логитеч 6 (без объектива), установленной на укороченную до 2 см монокулярнуюнасадку (без окуляра) отчетливо видимм радужный контур.
Расскажите пожалуйста подробнее об отечественной оптике на бесконечность. В чем ее конструктивное отличие? Достаточно ли для улучшения изображения на матрице вебкамеры приобрести объектив на бесконечность? Или необходимы капитальные затраты... Спасибо

Уважаемый Павел Олегович! Мне очень жаль, что ваш микроскоп не позволяет получить качественное изображение. Но на вашем микроскопе данный объектив будет работать очень плохо. Скорее всего это может быть связано с несовпадением плоскости изображения с плоскостью камеры, а также с одним из существенных параметров - осветительной системой. Штатив микроскопа МИКМЕД 1 конструктивно обеспечивает конечную длину тубуса объективов 160 мм. Плоскость изображения в этом микроскопе находится четко на расстоянии 13 мм ниже среза окулярной трубки (без окуляра). 147 мм обеспечивается расстоянием от опорной плоскости объектива (край гнезда под объектив в револьверном устройстве) до плоскости изображения. Из объектива выходит сходящийся в плоскости изображения пучок света, который и строит изображение. Объектив планапохроматический ОПА 100х1,30МИ, обладая большой числовой апертурой требует хорошей осветительной системы. Кроме того, объектив имеет хроматическую разность увеличения 2%. Т.е. это та аберрация, которая отвечает за цвет и контурную окраску.
На ваш вопрос по длине тубуса "бесконечность".
В объективах, рассчитанных на длину тубуса "бесконечность" после объектива выходит параллельный пучок, который формирует изображение на "бесконечность". Для того, чтобы "рассмотреть" изображение окуляром необходимо получить это изображение в плоскости изображения (расположенной на расстоянии 10-13 мм ниже среза окулярной трубки, как и в микроскопе с конечной длиной тубуса). Для этого после объектива на конструктивно удобном расстоянии устанавливается тубусная линза, которая превращает параллельный пучок света в сходящийся.
Можно было бы установить такие объективы и на микроскопы с конечной длиной тубуса Однако в этом случае надо заказать тубусную линзу с фокусным расстоянием 160 мм . Единственный минус - может не хватить рабочего расстояния, т.к. в микроскопах с конечной диной тубуса высота объективов может быть старой (33 мм,как в МИКМЕД 1) и новой (45 мм). Тубусная линза в оправе имеет толщину порядка 10-15 мм. Т.е. общее расстояние от опорной плоскости гнезда револьверной головки до плоскости предметного стола должна быть не менее 56-60 мм.
Преимуществом объективов с длиной тубуса "бесконечность" является нечувствительность по качеству изображения на появление входе лучей каких-либо оптических элементов (пластин, призм, клина и .т.д.)

Уважаемая Ольга Владимировна!
Я хочу приобрести ртутную лампу для микроскопа Olympus IX 50. Подскажите пожалуйста, где её можно найти

Лампы от микроскопов фирмы Olympus можно запросить в двух фирмах, расположенных в Москве: фирма ООО "ИНТЕРГЕН" тел. 495-506-41-20 e-mail: olympus.bio@gmail.com и фирма ООО "Химинст" тел.факс: 495-937-5026 e-mail:info@cheminst.ru. Если не в одной, то в другой обязательно будет.

стоимость микроскопа

от 60 Евро до 1 млн Евро и более, с учетом электронного, который еще больше. Каков вопрос - таков ответ:))) А если серьезно - это не вопрос, т.к. мир микроскопов разнообразен, поэтому не удивляйтесь такому разбросу.